Метод ПЦР в диагностике хламидиоза

По статистике, в мире ежегодно заболевает хламидиозом 100 млн. человек. Согласно информации ВОЗ, урогенитальный хламидиоз – это самая частая инфекция, передающаяся половым путём. Заболеванию чаще подвержены женщины и мужчины, но заражаются и дети. Ежегодно 100 тыс. женщин остаются бесплодными по причине хламидиоза. Инфекция является причиной мертворождённого плода, преждевременных родов и смерти новорождённых.

Для успешного лечения важно правильно поставить диагноз. Сегодня мы рассмотрим точный метод диагностики хламидиоза – анализ ПЦР. Узнаем, как следует готовиться к анализу и что нельзя делать мужчинам и женщинам перед сдачей материала.

Что такое хламидиоз

Хотя инфекция чаще передаётся половым путём, возможно внутриутробное заражение плода или во время родов. Заболевание вызывает атипичная бактерия Chlamidia trachomatis. Возбудитель заболевания наполовину вирус, наполовину бактерия, и поэтому трудно поддаётся обнаружению.

Хламидиоз — заболевание, передающееся половым путем

Инкубационный период заболевания 2-4 недели. Пути заражения хламидиозом – сексуальный вагинальный и анальный. Бытовой путь заражения происходит в сауне и бане. В домашних условиях возможен перенос инфекции с загрязнённых рук на глаза или при пользовании общим полотенцем. Дети заражаются во время родов при прохождении по родовым путям заражённой матери.

Какие заболевания вызывает хламидия

Заражение хламидиозом происходит во время контакта выделений из половых органов со слизистой оболочкой партнёра. Частые последствия инфекции:

• У мужчин заболевание протекает в виде воспаления мочевыводящего канала – уретрита.
• Другие частые клинические формы хламидиоза у мужчин – цистит и простатит.
• Воспалительный процесс шейки матки у женщин – цервицит.
• Проктит – воспаление прямой кишки.
• Воспаление фаллопиевых труб и внутренней оболочки матки – сальпингит и эндометрит.
• Внематочная беременность. При внематочной беременности в 25–50% случаев выявляютсяхламидии в мазке.
• Бесплодие у женщин имужчин развивается в результате воспалительного процесса или рубцовых изменений органов малого таза.

Хламидиоз относится к восходящему типу инфекций. Они начинаются с нижнего мочеполового тракта, а поднимаясь выше, вызывают воспалительные и спаечные процессы, угрожающие бесплодием. Хламидиоз у мужчин вызывает нарушение потенции и бесплодие.

Круг заболеваний расширяется при ослабленной иммунной системе. При этом поражаются органы дыхания в виде хламидийной пневмонии. Развиваются хламидийные артриты и конъюнктивиты.

Диагностика хламидиоза

Выявление хламидиоза затрудняется тем, что в 50–67% случаев инфекция протекает бессимптомно или проявляется признаками, похожими на другие инфекции половых путей.

В настоящее время самый чувствительный метод выявления хламидиоза – анализ ПЦР.

Он обладает 100% специфичностью и является достоверным методом диагностики, не требующим подтверждения другими анализами. Аббревиатура ПЦР – полимеразная цепная реакция. Принцип анализа основан на обнаружении ДНК хламидии.

Желательно использовать несколько методов диагностики

У анализа ПЦР имеются преимущества перед другими методами:

• Реакция очень чувствительна – обнаруживает мельчайшую частичку возбудителя заболевания.
• АнализПЦР – это быстрый метод обследования. Постановка анализа длится несколько часов, а ответ выдают на следующий день.
• Методпозволяет обнаруживать непосредственно возбудителя болезни, а не реакцию организма после инфицирования. Это преимущество позволяет выявить возбудителя даже в инкубационном периоде болезни, когда у человека нет признаков заражения.
• ПЦР –это 100% специфичный метод. Он основан на обнаружении ДНК, специфичной только для этого возбудителя болезни. ДНК (дезоксирибонуклеиновая кислота) – это формула (код) генетической цепочки всех живых созданий от вируса до слона. У каждого существа своя специфическая цепочка ДНК.
• Отсутствие противопоказаний для постановки реакции.

Комплекс лабораторных исследований помогут выявить возбудителя и стадию заболевания

Метод ПЦР имеет и некоторые недостатки:

• Анализможет давать ложноположительный результат при несоблюдении правил проведения анализа. Поэтому лаборатория для проведения ПЦР оснащена фильтрами воздуха. Требование к фильтрации в лаборатории составляет 99, 9%.
• ПЦР даёт ложноотрицательный ответ даже при развёрнутой картине заболевания, если не соблюдены правила взятия материала.
• Положительный результат возможен в случае перенесённой и вылеченной инфекции, потому что метод определяет и живого, и мёртвого возбудителя болезни.

Интерпретировать результат должен лечащий врач. В случае если врач сомневается в активности хламидиоза при положительном ответе ПЦР, он назначает ИФА (иммуноферментный анализ). Метод ИФА определяет иммунный ответ, который уточняет стадию хламидиоза – острого процесса или перенесённой инфекции.

Подготовка к забору материала для ПЦР у мужчин

Что нельзя делать мужчинам, перед тем как сдавать анализ:

• за 3 часа до забора мочи нельзя мочиться;
• использовать растворы для дезинфекции;
• применять бактерицидное мыло;
• нежелательна интимная близость за 36 часов до взятия материала.

Правильная подготовка важна для выдачи результата ПЦР. Ошибки этого этапа дают ложноположительный или ложноотрицательный результат.

Подготовка к забору материала для ПЦР у женщин

Для достоверного ответа анализа нужно правильно сдавать анализ. Перед забором материала для ПЦР у женщин нельзя:

• мочиться 3 часа, еслианализ берут из уретры;
• нельзя применять бактерицидное мыло;
• вагинальные свечи, противовоспалительные и дезинфицирующие жидкие средства не применяют за 36 часов до взятия материала;
• нежелателен половой контакт за 36 часов до забора материала;
• нельзя спринцеваться;
• сдавать анализыво время менструального цикла.

Подготовка к сдаче анализа не представляет особых сложностей

От того, насколько правильно взят материал, зависит достоверность результата, поэтому материал для ПЦР должен брать врач. Специалисты лабораторий считают момент взятия материала самым важным этапом диагностики.

Методика проведения ПЦР

Анализ ПЦР выявляет ДНК хламидии. Для исследуемого материала у мужчин берут секрет предстательной железы, сперму или соскоб из уретры. В некоторых случаях для ПЦР у мужчин берут кровь. У женщин берут мазок или соскоб из уретры, влагалища или цервикального канала. При половом пути заражения для выявления урогенитального хламидиоза берут соскоб с больного органа, а не мазок на хламидии. Для уточнения диагностики трахомы берут соскоб с конъюнктивы глаз.

При проведении ПЦР в пробирки с материалом добавляют специальные реактивы и ставят в прибор. Метод осуществляется прибором автоматически в заданном режиме. Ответ результата ПЦР выглядит как положительный или отрицательный. Если в исследуемом материале обнаружены хламидии, выдаётся положительный ответ.

Нет ни одного метода, который бы на 100% точно выявил хламидиоз и фазу развития процесса.

ПЦР — экспериментальный метод биохимии

Поэтому, если в анализе ПЦР обнаружены хламидии, следует уточнить стадию заболевания анализом ИФА. Интерпретацию анализов проводит врач с учётом анамнеза клинической картины заболевания.

Показания для ПЦР

Анализ ПЦР назначается в таких случаях:

• острая урогенитальная инфекция, при которой появляется жжение, зуд, изменившийся запах выделений из половых органов и дискомфорт при мочеиспускании. У мужчин в конце мочеиспускания появляется кровь.
• Затянувшаяся инфекция мочеполового тракта у женщин – кольпит, эрозия шейки матки или остроконечные кондиломы.
• Патологические изменения при беременности – отягощённый акушерский анамнез.
• Выкидыши и мертворождение.
• Бесплодие.

Анализ ПЦР назначается и для проверки эффективности антибактериального лечения хламидиоза, но не раньше чем через месяц из-за возможного получения ложноположительного результата.

В заключение напомним, хламидиоз – это наиболее распространённая урогенитальная инфекция, передающаяся половым путём. Заболевание является причиной женского и мужского бесплодия. Инфекция поражает детей внутриутробно или при рождении. На современном этапе достоверный и специфичный метод диагностики болезни – анализ ПЦР. Для анализа используется мазок или чаще соскоб эпителиальных клеток, а также кровь, осадок мочи или сперма. В ряде случаев для уточнения стадии хламидиоза метод ПЦР дополняется анализом ИФА.